欧洲肿瘤学会年会 (ESMO 2023) 于欧洲中部时间2023年10月24日在西班牙马德里圆满落下帷幕。作为全球最具影响力的肿瘤学会议之一，本次ESMO大会吸引了基础、转化、药物临床、新技术等多学科，超过3万名专家学者参会。其中有22项关于肿瘤分子残留病灶 (Minimal Residual Disease，MRD) 的研究在会议中以口头报告 (oral) 或者海报展示 (poster) 的形式进行了发布，应用场景覆盖了肿瘤诊疗的全周期：新辅助疗效监测、术后MRD诊断、术后辅助治疗分层及长期复发监测。

共有7项研究应用了Signatera MRD检测 (华大基因独家引进，中文名称：华见微®)，其中6篇发布了ctDNA监测相关的结果，包含结肠癌 (# 558MO)、直肠癌 (# 590P)、肝癌 (# 960P)、肾癌 (# 1908P)、胆管癌 (# 114P)、尿路上皮癌 (# 2397P) 等多个癌种，依然是业内关注焦点。

本文将重点介绍其中4篇研究：

1. Abstract # 558MO | 结直肠癌 | Oral presentation

CIRCULATE-Japan: GALAXY研究发布更新结果

Circulating tumor (ct)DNA as a prognostic biomarker in patients (pts) with resected colorectal cancer (CRC): An updated 24 months (mos) disease free survival (DFS) analysis from GALAXY study (CIRCULATE-Japan)

背景：CIRCULATE-Japan是针对Ⅱ~Ⅳ期结直肠癌 (CRC) MRD的注册临床研究，预期入组5,200人，分为三个分支，包括GALAXY观察性分支 (主要分支) 和术后阴性及术后阳性两个干预性分支。其结果连续在ASCO、ASCO-GI、ESMO等会议上以口头报告形式发表，2023年1月，GALAXY分支的首次统计结果发表于自然医学杂志 (Nature Medicine)[1]。

方法：本次更新的数据包含了3,034名CRC患者的2年随访结果。研究采用Signatera/华见微®来定量血浆样品中的ctDNA，分析术后第 1 (即4周MRD时间点)、3、6、9、12、18和24个月直至复发，主要终点是DFS，最终分析纳入2,625名患者。

亮点结果：

① 术后MRD检测窗口期：2-10周，在此窗口期内术后阳性患者的两年生存率远低于术后阴性患者的两年生存率 (31% vs 89%) (图1-1)。

② 与DYNAMIC研究[2]结果一致：对于II-III期CRC患者，术后 (2个月) ctDNA阴性患者不能通过辅助化疗改善生存，即可以省去辅助化疗 (图1-2)，而对于术后阳性的患者，辅助化疗则可显著提高生存率，如不能接受辅助化疗，则复发风险为接受治疗人群的3.29倍，且接受6个月的化疗对于阳性患者更有利。

③ 术后三个月ctDNA的动态变化分析 (ctDNA Dynamics)：根据患者ctDNA的状态和阴阳性变化可以明确将患者分为4层，其中持续阴性的患者 (蓝色线) 在术后两年中的复发率仅为6.8%，而持续阳性的患者 (红色线) 复发率则高达81.1%；阳转阴和阴转阳的患者复发率分别为36.7% (绿色线) 和60.7% (紫色线)。连续监测 (longitudinal mornitoring) 可以将患者明确分层，精准预测预后，体现了连续监测的重要性。

图1-1. 术后ctDNA阴性与阳性患者总体DFS对比

图1-2. 术后ctDNA阴性与阳性患者接受辅助化疗的生存情况对比

图1-3. 术后3个月ctDNA动态变化与预后 (DFS) 的关系

2. Abstract # 590P | 局部晚期直肠癌 | Poster

Assessment of circulating tumor (ct)DNA in patients (pts) with locally advanced rectal cancer (LARC) pts treated with neoadjuvant therapy (NAT)

循环肿瘤ctDNA用于评估接受新辅助治疗的局部晚期直肠癌 (LARC) 患者的疗效

背景：直肠癌占结直肠癌 (CRC) 的大约30%，近些年来，直肠癌新辅助治疗兴起，新辅助+直肠全系膜切除术 (TME)+术后辅助化疗成为主要的治疗形式，然而患者总体的生存获益依然存疑，亟需新辅助后和术后分层的生物标志物。

方法：研究纳入接受放化疗和TME手术的LARC患者30名 (90个血浆样本)，监测点设置为新辅助治疗前 (pre-NAT)，新辅助治疗后 (post-NAT, 11周，re-staging) 和手术后，采用Signatera/华见微®MRD定制化检测进行回顾性检测，中位随访时间为60个月 (range，10-118 months)。

亮点结果：

① 新辅助治疗后监测点 (post-NAT)：在该点ctDNA阳性的患者全部复发，即Signatera在该点的阳性预测值 (PPV) 为100%，复发风险为阴性患者的7.82倍，阴性患者复发率为28% (图2-1)；手术后 (post-OP) 监测点：在该点ctDNA阳性的患者也全部在术后两年内复发 (PPV为100%)，复发风险为阴性患者的13.24倍。

② 采用新辅助治疗后的ctDNA阴阳性结果 (post-NAT ctDNA) 联合新辅助直肠评分 (NAR score)，可以实现对患者更精准的复发风险分层。如图2-2所示，若post-NAT ctDNA阴性且/NAR score为低，则患者在5年随访期内的复发率为0；若post-NAT ctDNA阴性/且NAR score为中或高，则5年内复发风险为中，近半数患者发生本研究中的复发率为 (43.8%)；若post-NAT ctDNA阳性/且NAR score为中或高，则患者有极高风险在5年内复发，本研究中复发率为100%。

图2-1. 患者新辅助治疗后及术后ctDNA阴阳性生存情况对比

图2-2. 新辅助后Post-NAT ctDNA评估联合NAR评分可以预测预后 (DFS)

3. Abstract # 960P | 肝细胞癌 | Poster

Personalized circulating tumor DNA (ctDNA) monitoring for recurrence detection and treatment response assessment in hepatocellular carcinoma (HCC)

个性化循环肿瘤ctDNA检测用于肝细胞癌复发监测和治疗反应评估

背景：原发性肝癌占肝癌总体发病率的90%以上，以治愈为目的的手术主要包括肝切和肝移植。一般肝切后仍有40-70%的患者会复发，肝移植术后效果较好，但仍有8-20%的患者会复发。

方法：本研究为多中心、回顾性研究，研究采用Signatera/华见微®检测，共分析了以I-II期肝癌为主 (73%) 的66名患者 (含35%肝切患者，62%肝移植患者) 的227个血浆样本。按肝移植、肝切及复发治疗将患者分为A、B、C三个组 (cohort)，中位随访时间达584天 (range: 79-1537)。

亮点结果：

① 肝移植组 (cohort A，n=34)：34名患者全部为ctDNA阴性，且在随访期内未复发；

② 肝切组 (cohort B，n=25)：9名术后阳性患者 (36%) 中的6名发生临床复发，另外3名失访；ctDNA可比影像学平均提前52天发现复发 (range: 0-262 days)；在术后阴性患者中，仅有1名发生临床复发

③ 复发治疗组 (cohort C，n=7)：4名阳性患者的ctDNA变化与临床影像监测相符 (57%)，3名患者经治疗后ctDNA清零，且在随访期内未复发，总体临床符合率达100%。

④ 和传统肝癌肿标AFP相比，定制化ctDNA监测可以更准确地反映患者的肿瘤负荷变化状态。在下图的两个患者中，肿标AFP检测均提示正常，但ctDNA一直为阳性，且在急剧升高后2-3个月发生影像学复发。

图3-1. 典型案例：采用Signatera/华见微®MRD定制化检测与肿标AFP检测对比

4. Abstract # 1908P | 肾细胞癌 | Poster

Utility of circulating tumor (ct)DNA testing for molecular residual disease (MRD) detection and treatment response monitoring in patients (pts) with renal cell carcinoma (RCC)

应用ctDNA 检测对肾细胞癌患者进行MRD检测和治疗反应监测

背景：由于肾细胞癌的异质性，在肾切除术后，患者的临床结局也会有很大差异，临床上依然缺乏肾癌的生物标志物。

方法：本研究为多中心真实世界研究 (RWD analysis)，共入组83名I-IV期经肾切除术 (含转移灶切除术) 后达到无疾病 (NED) 状态的肾细胞癌患者。采用 (Signatera/华见微®) 来长期监测术后外周血中的ctDNA的变化情况，最终有63名患者的265个血浆样本被纳入分析，以III期 (83%) 和透明细胞癌患者 (81%) 为主，中位随访时间达43.9个月 (range: 22.9-84.1)。

亮点结果：

① 术后 (13周) MRD 窗口期检测ctDNA-MRD阴性的患者 (n=54) 在长期随访中相对阳性患者有明显的无复发生存优势 (p=0.0003)。术后 (13周) ctDNA阳性患者的复发风险是阴性患者的7.6倍。

图4-1. 术后13周ctDNA-MRD阴阳性患者的无复发生存对比

结  语

以上研究再次证实了 (Signatera/华见微®) 在泛实体瘤中的临床应用价值。通过对基于ctDNA的MRD定制化检测，我们可以更准确地预测患者的复发风险，并据此制定更有效的治疗策略。这对于提高患者生存率和生活质量具有重要意义。肿瘤监测的意义正在被越来越多人看到和认可。

Signatera MRD是目前临床验证数据极多，得到国外临床专家和监管部门认可 (NCCN结直肠癌指南引用，FDA突破性医疗器械认定、CE认证、美国Medicare政府医保覆盖) 的MRD检测技术。2019年，华大基因与美国著名的液体活检公司-Natera公司签订了独家技术引进协议，成为中国唯一提供Signatera MRD检测的机构 (中文名：华见微®肿瘤MRD定制化检测)。借助华大的国产自主测序平台MGISEQ-2000，华见微®将可以惠及更多中国患者。

参考文献：

1. Circulate-Japan Galaxy study首次结果 https://doi.org/10.1038/s41591-022-02115-4

2. DYNAMIC study: https://doi.org/10.1056/NEJMoa2200075